Page 106 - 69_04

J. RUBIO RETAMA Y COLS. ANAL. REAL ACAD. NAL. FARM.

SUMMARY
Optimization of glucose oxidase entrapment in polyacrylamide microgels

The synthesis of polyacrylamide microgels using the concentrated emulsion
pathway (W/O), without and with entrapped glucose oxidase from Aspergillus niger is
proposed. The effect of initiator concentration in the maximum temperature of polymeri-

zation and the conversion rate of the monomer as a function of time were studied in the

microparticles without enzyme. As a result of the polymerization, spherical mi-

cropartículas were obtained in all the cases with a range of size between 2.5 ?m and 6.2
?m of diameter In the microgels with enzyme the effect of the cross-linking content in
the kinetic parameters was studied.. The use of the microgels with enzyme as the bio-
logical material of a amperométric biosensor allowed to evaluate the enzymatic activity
of the glucose oxidase entrapped in the polymer. The catalytic activity of the entrapped

enzyme and the biosensor response were affected by the cross-linking content of the mi-

crogel. The biosensor response was also affected by the quantity of microparticles im-

mobilized in the surface of the electrode that acts as transducer of the biosensor.

Key words: Synthesis of microgels.— Concentrated emulsion.— Glucose oxidase.—
Entrapment in polyacrylamide microgels.

INTRODUCCIÓN

En farmacia, medicina y biotecnología se han desarrollado un gran
número de aplicaciones de las micropartículas de polímeros hidrofílicos.
De todas ellas, la inmovilización de enzimas en estos sistemas ha sido
intensamente investigada en los últimos años. La utilización de
microgeles permite obtener sistemas con una gran relación
superficie/volumen en la que poder unir o atrapar un enzima, que

reaccionará posteriormente con un sustrato. Estos sistemas presentan una
excelente estabilidad debido a que el enzima esta protegido por la matriz

polimérica, preservando su actividad durante largos períodos de tiempo.
Son muchas las técnicas de inmovilización que se han descrito en los
últimos años, de todas ellas destacamos el método de atrapamiento a
partir de la polimerización desde emulsiones concentradas, que ha sido
propuesto como un método idóneo para llevar acabo la inmovilización de
gran variedad de enzimas [1-6]. Este método consiste en preparar una
emulsión (W/O) con una fase acuosa superior al 75% del volumen total
de la emulsión [7-12]. En este tipo de emulsiones, las gotas dispersadas
forman estructuras poliédricas separadas por una pequeña película de fase

120