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VOL. 69 (4) OPTIMIZACIÓN DE LA INMOVILIZACIÓN DE GLUCOSA OXIDASA
Para comenzar la polimerización se añadió TEMED. Después de
una hora de polimerización las micropartículas se precipitaron con
metanol frío y se aislaron mediante centrifugación a 10.000 rpm durante
10 minutos a 10 ºC. Posteriormente se lavaron las micropartículas con
acetona. Para su conservación durante largos períodos de tiempo se
liofilizaron y almacenaron a 4 ºC. En la Figura 1 se pueden observar las
micropartículas de poliacrilamida sin enzima obtenidas. Sus diámetros se
encontraron comprendidos entre las 2,5 ?m y 7 ?m.
FIGURA 1.- Micrografía de micropartículas de poliacrilamida vacías
Control de la temperatura de polimerización
Un factor clave en la inmovilización de enzimas es la temperatura a la
cual se realiza la polimerización. La reacción de polimerización es una
reacción exotérmica cuya temperatura depende de la cantidad de agente
iniciador utilizado en la síntesis. Por esta razón, se realizaron distintas
síntesis variando la cantidad de iniciador desde 7 mM hasta 22 mM. La
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