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relevancia estad%u00edstica. Las lesionespulmonares severas, en los animales tratados,podr%u00edan deberse a una respuesta inflamatorialocalizada inducida por el tratamientolentiviral, favorecida por eventos de microtromboembolismos o acumulaci%u00f3n de fibrinaen la microvasculatura pulmonar. Laacumulaci%u00f3n de fibrina tambi%u00e9n podr%u00eda estarestimulando la inflamaci%u00f3n peribronquiolar yperivascular, actuando como un potentedesencadenante para la migraci%u00f3n de c%u00e9lulasinflamatorias, lo que siempre agrava el da%u00f1ohistol%u00f3gico en el pulm%u00f3n. De igual forma,podr%u00eda existir un per%u00edodo inicial de actividadprocoagulante derivado de la elevada cantidadde FV introducido, que podr%u00eda estar generandoun estado de hipercoagulabilidad temporal enlos animales tratados.Respecto a los estudios deinmunohistoqu%u00edmica, en los %u00f3rganos quepresentaron inmunorreacci%u00f3n positiva para FVen animales WT, hubo descenso de %u00e9sta enanimales Hm sin tratar; la inmunorreacci%u00f3n sevolvi%u00f3 a recuperar en los animales Hm tratadoscon lentivirus, en la mayor%u00eda de los tejidos sindiferencia entre las dosis. Por otro lado seanaliz%u00f3 la trombina, que es una mol%u00e9culaesencial en la cascada de la coagulaci%u00f3n,siendo su producci%u00f3n dependiente de la acci%u00f3ndel FV, por lo que su expresi%u00f3n va a estarinfluenciada directamente por la de FV (64).Al igual que en FV, se encuentran tambi%u00e9ndiferencias de inmunorreacci%u00f3n para trombinaen pulm%u00f3n y en cerebro, lo cual confirmar%u00eda larelaci%u00f3n entre ambas prote%u00ednas. La trombina,adem%u00e1s, es conocida por su capacidad parainducir respuestas inflamatorias a nivel celulary en el pulm%u00f3n, mediante la producci%u00f3n decitoquinas, como la IL-8 en c%u00e9lulas epiteliales,que estimulan el reclutamiento de c%u00e9lulasinflamatorias adicionales, exacerbando lainflamaci%u00f3n local.Por %u00faltimo, se analiz%u00f3 la %u03b1-actina dem%u00fasculo liso que es una prote%u00edna estructuralesencial para la contracci%u00f3n de las c%u00e9lulas enese tejido y que desempe%u00f1a un papel clave enl%u00edmite m%u00e1ximo en la capacidad de las c%u00e9lulaspara procesar o expresar FV a partir del vectorlentiviral.En los estudios in vivo, respecto a los valoresde los par%u00e1metros coagulom%u00e9tricos enanimales WT, Hz y Hm sin tratamiento, losresultados obtenidos coinciden con losdescritos en el modelo animal patol%u00f3gico(Figura 5), lo que refuerza la consistencia yreproducibilidad de los datos. Esta estabilidaden los par%u00e1metros coagulantes de referenciapermite una base s%u00f3lida para comparar losefectos del tratamiento. En los animales Hmtratados se observ%u00f3 un aumento significativoen los niveles de FV, y una disminuci%u00f3n del TPy del TTPa, lo cual sugiere una mejora en lafunci%u00f3n coagulante en respuesta a la terapia,evidenciando un efecto positivo del vectorlentiviral. Adem%u00e1s, la prote%u00edna FV humana sedetect%u00f3 mediante Western blot tanto en elplasma control de origen humano como en elplasma de los animales tratados con vectorlentiviral.Se analiz%u00f3, adem%u00e1s, la integraci%u00f3n delvector lentiviral en los tejidos hep%u00e1ticos de losratones mediante la cuantificaci%u00f3n del n%u00famerode copias del vector por c%u00e9lula (VCN),utilizando qPCR. En todas las muestras, seobservaron valores detectables de VCN salvoen los controles, confirmando la integraci%u00f3ndel vector lentiviral en el genoma de loshepatocitos, lo que concuerda con la llegadadel vector que porta promotor hep%u00e1tico. Estosresultados de integraci%u00f3n hep%u00e1tica coincidencon estudios previos con vectores lentiviralesen modelos de rat%u00f3n con hemofilia B (63).Tambi%u00e9n se llev%u00f3 a cabo un estudioexhaustivo %u2015a modo de prueba precl%u00ednica enanimal%u2015 de las lesiones histopatol%u00f3gicas. Enanimales WT y Hm sin tratar, no se observaronlesiones tisulares ni en %u00f3rganos. Sin embargo,en los animales tratados con el vectorlentiviral, s%u00ed se observaron diferenciassignificativas en la gravedad de las lesiones,particularmente en el tejido pulmonar,mientras que en otros %u00f3rganos solo seencontraron alteraciones ocasionales y sin38ANALESRANFwww.analesranf.comD%u00e9ficit de factor V y terapias avanzadasAntonio Liras et al.An. R.Acad. Farm.Vol. 91. n%u00ba1 (2025) %u00b7 pp. 17-44