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Effectiveness and pharmacogenetics in a deprescription protocol in chronic pain patients and iatrogenic opioid dependence
2.2.b. Variables clínicas.
Para evaluar la situación clínica de cada paciente se
utilizaron una serie de escalas validadas y cuestionarios
que se cumplimentaron en cada consulta. Para evaluar la
intensidad del dolor y el alivio, utilizamos la Escala Visual
Análoga (EVA), donde el paciente señala sobre una línea
de 100 mm, la intensidad de dolor y el alivio que siente
con el tratamiento, respectivamente. Para valorar la calidad
de vida que presenta el paciente, se emplea la escala
EuroQol50, en la cual el paciente señala con un punto su
estado de salud actual en cada consulta. Es una escala
vertical que va desde 0 hasta 100 y donde el paciente
señala con un punto su estado de salud actual en cada
consulta, siendo 0 el peor estado de salud imaginable y
100 el mejor. Para evaluar el Síndrome de Abstinencia a
Opioides, se emplea la Opiate Withdrawal Scale (OWS),
que es una escala formada por 32 signos y síntomas
característicos de la abstinencia a opioides. Cada ítem se
valora como 0 (ausente), 1 (leve), 2 (moderado) o 3
(severo), dependiendo del grado con que se manifieste
cada uno en el paciente.obteniéndose como resultado una
puntuacion entre 0 y 96 puntos, en orden creciente de
gravedad. Se utiliza la Escala de Evaluación de Actividad
Global (EEAG), que evalúa la actividad psicológica, social
y laboral sobre 100 puntos. A mayor puntuación, mejor
nivel de actividad y de vida.
2.2.c Variables farmacológicas.
Se registra la medicación prescrita al paciente en cada
consulta, incluyendo toda la medicación opioide del
paciente, así como gabapentina, pregabalina, duloxetina,
analgésicos, AINEs y benzodiacepinas. Se calcula las
dosis diarias de opioides, expresadas en mg equivalentes
de morfina (DEMD), en todas las visitas. También se
registraron los efectos adversos (EA) que presentó el
paciente en cada una de las visitas.
2.3. Estudio farmacogenético
La muestra de cada paciente se recogió coincidiendo
con su visita inicial, una vez dentro del estudio. El paciente los pacientes se anonimizaron y se procesaron de acuerdo
deposita en un tubo Falcon 2 ml de saliva. Una vez
recogida la muestra, ha de mantenerse a -80ºC en
congelador, hasta su procesamiento.
A partir de la muestra de saliva, se procedió a la
extracción de ADN, mediante el kit
E.N.Z.A. Forensic DNA Kit (Omega bio-tek),
siguiendo el protocolo del fabricante. Para su
cuantificación se utilizó el espectofotómetro Nanodrop
1000 (Thermo Scientific). Una vez medidas las
concentraciones, las muestras fueron almacenadas en el
congelador a -20.
Una vez extraído el ADN de las muestras, el
genotipado de los 5 SNP del estudio se realizó mediante el
sistema Real Time PCR Rotor Gene Q (Qiagen),
empleando sondas específicas TaqMan MGB® (Applied
Biosystems). Los genotipos se determinaron mediante esta
técnica, que se trata de una reacción en cadena de
@Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
polimerasa (PCR) a tiempo real, y que permite que la
amplificación del ADN y la detección de los alelos
específicos del SNP se produzcan simultáneamente. Se
requiere un molde de ADN, una ADN polimerasa, primers
específicos, dNTPs y un tampón de reacción. Se
emplearon las sondas TaqMan MGB® (Applied
Biosystems), un oligonucleótido marcados
fluorescentemente con dos fluorocromos, para la detección
de los alelos específicos mediante fluorescencia. Todas las
muestras se analizan por duplicado y se emplearon
controles negativos para cada SNP. Las Condiciones del
termociclador, empleadas fueron las siguientes: 1.Tramo
de pre-PCR: 60 ºC; 30 segundos; 2. Desnaturalización
inicial; 3. Desnaturalización: 95 ºC; 15 segundos; 4.
Anillamiento y elongación: 60 ºC; 1 minuto; 5. Elongación
final, 72 ºC; 30 segundos.
2.4. Análisis estadístico
Se realizó un análisis univariante para la descripción de
la muestra. Según la distribución que presentaron las
variables del estudio, se realizaron pruebas paramétricas o
no paramétricas. Las variables continuas con distribución
normal, fueron descritas a través de medias y desviaciones
estándar, mientras que las que no presentaron distribución
normal se expresaron a través de su mediana y rango
intercuartílico. Se calcularon frecuencias y porcentajes
para las variables categóricas. Se analizaron las medidas
mediante el test T de Student. Se utilizó la prueba Chi
Cuadrado para el análisis de datos categóricos. Se realizó
un análisis multivariante para analizar la variable principal
respecto a los posibles factores o covariables. Los
contrastes de hipótesis fueron bilaterales, con una
significación de 0,05. Todos los análisis estadísticos se
realizaron con el programa estadístico R 3.2.0. y GraphPad
Prism 5.
2.5. Aspectos éticos
Todos los pacientes incluidos en el estudio fueron
informados a través la hoja de información al paciente y
firmado el consentimiento informado (CI). Los datos de
con los requerimientos expresados en la Declaración de
Helsinki (revisión de Seúl, Octubre de 2008), las
directrices de buenas prácticas clínicas de la ICH así como
la legislación vigente en España relativa a la realización de
estudios observacionales.
2.6. Plan de trabajo
Se realizó una visita basal donde se revisaron los
criterios de inclusión y exclusión, se informó debidamente
al paciente, se firmó el CI y se obtuvo la muestra de saliva.
Durante las visitas de seguimiento (a los 7 y 14 días, 1
y 3 meses) y la visita final (5-6 meses), se realizó una
revisión general, revisión del dolor y seguimiento de las
variables clínicas mediante los cuestionarios del estudio.
(Figura 1).
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