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Clinical applications of adipose-derived stem cells and aspects related with good manufacturing practices
través de las diversas investigaciones se han descrito
algunas diferencias con respecto al perfil que presentarían
las ASCs, llegando al consenso de que las ASCs resultan
positivas para los marcadores: CD13, CD29, CD44,
CD49d, CD90 y CD105. Siendo negativas para
marcadores como CD14, CD31, CD45 y CD144, que
corresponden a antígenos hematopoyéticos (9,64,65).
(3) Diferenciación a condroblastos, osteoblastos y
adipocitos. Este criterio es el de mayor relevancia y se
realiza induciendo la diferenciación de las ASCs a las
líneas celulares ya mencionadas. La diferenciación a
osteoblastos se puede llevar a cabo utilizando un medio de
cultivo que contenga como agentes inductores
osteogénicos, dexametasona (0,1 µM), ácido L-ascórbico
2-fofato (50 µM) y ß-glicerofosfato (10 mM), que luego
puede ser confirmada mediante tinción von Kossa, que
produce un precipitado negro-marrón en presencia de
fosfato de calcio (11,54). De modo similar, para la
diferenciación a adipocitos se pueden utilizar como
inductores: dexametasona (1,0 µM), 3-isobutil-1-
metilxantina (IBMX 0,5 mM), indometacina (0,2 mM) e
insulina (10 µM), dicha diferenciación se confirma
mediante la formación de vacuolas y su tinción con Oil
Red O. Conjuntamente, en el caso de los condroblastos, se
puede inducir la diferenciación utilizando L-ascorbato-2-
fosfato (50 µg/mL), insulina (6,25 µg/mL), transferrina
(6,25 µg/mL) y factor de crecimiento transformante ß1
(TGFß1, 10 ng/mL), y se confirma la condrogénesis
fijándolos en paraformaldehído al 4,0%, incubándolos con
HCl (0,1 N) y determinando la presencia de proteoglicanos
sulfatados con tinción Azul Alcián (54).
Por otra parte, un producto basado en células madres se
puede considerar “puro” aun cuando contenga más de un
tipo celular. Dentro de los contaminantes de interés se
pueden presentar células madres residuales y células que
se han diferenciado a un tipo celular no deseado, para las
cuales se deben definir criterios de aceptación, que limiten
su cantidad (58). Se considera que la ausencia de un
contaminante de este tipo se podría garantizar por la
incapacidad de detectar el tipo celular en una muestra del
producto (63).
Por último, la potencia, que se reconoce como la
medida cuantitativa de la actividad biológica de un
producto, debe ser evaluada con respecto al efecto
biológico deseado (63), es decir, a la respuesta clínica que
se obtenga con las ASCs. Las pruebas de potencia pueden
llevarse a cabo tanto in vitro en líneas celulares, como in
vivo en animales, deben realizarse con un número validado
de células y el resultado se expresa mediante el tiempo
requerido para obtener el efecto buscado, como
restauración de una función o reparación de una estructura
anatómica (58).
8. CONCLUSIÓN
El gran progreso en el área de investigación de células
madres derivadas de adipocitos ha logrado demostrar que
éstas presentan ventajas que avalan el desarrollo que han
tenido en su aplicación como terapia regenerativa,
@Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
mediante los múltiples ensayos clínicos que se están
desarrollando y la primera terapia recientemente aprobada
por la EMA, lo que las ha posicionado dentro del mercado
farmacéutico. Estos avances significan un beneficio
considerable para los pacientes, sobre todo para aquellos
que sufren ciertas enfermedades que conllevan
complicaciones de difícil manejo, en que el organismo no
es capaz de recuperar su función con los tratamientos
actuales. Se espera que esta alternativa de medicina
regenerativa se siga potenciando, por lo que es de vital
importancia llevar a cabo un proceso de producción que
cumpla con los sistemas de calidad existentes. Por su
parte, debido a alta variabilidad que pueden presentar los
productos celulares de acuerdo a su producción, se
considera necesario que dichos sistemas de calidad
también se sigan desarrollando y sean cada vez más
específicos para cada producto celular, con el fin de
asegurar la eficacia y seguridad en los pacientes.
9. LISTA DE ABREVIATURAS
ASCs adipose-derived stem cells, células troncales
derivadas de tejido adiposo.
bFGF factor de crecimiento básico derivado de
fibroblastos.
BHE barrera hematoencefálica.
BPA buenas prácticas actuales de tejidos.
BPM buenas prácticas de manufactura.
DMEM Dulbecco´s modified Eagle´s medium.
EMA Agencia Europea del Medicamento.
FDA Food and Drug Administration.
FGF-2 factor de crecimiento de fibroblastos 2.
HGF factor de crecimiento derivado de hepatocitos.
IM infarto al miocardio.
ISCT International Society for Cellular Therapy.
MSC-BM mesenchymal stem cells derived from bone
marrow, células madre mesenquimales derivadas de
médula ósea.
MSCs células madre mesenquimales.
SC stem cells, células madre.
SVF fracción vascular estromal.
VEGF factor de crecimiento endotelial vascular.
CONFLICTO DE INTERÉS
INBIOCRIOTEC SA es un Consorcio Biotecnológico
chileno y tiene por objeto transferir al mercado,
invenciones, servicios, productos y/o terapias de alta
tecnología en ingeniería de tejidos y bancos de
criopreservación en forma rentable y que apoyen el
desarrollo de la Medicina Regenerativa para el mercado
nacional e internacional.
10. AGRADECIMIENTOS
Caroline Weinstein-Oppenheimer y Patricia Carreño
González son investigadoras del Centro de Investigación
Farmacopea Chilena, Universidad de Valparaíso, Chile.
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