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P. 135

E.	
  M.	
  González-­-Burgos	
  &	
  al.	
  

	
                      MDA (nmoles / mg proteína)                                         5 µM   MDA (nmoles / mg proteína)  1,4           **                   5 µM
A)	
                                                                                       10 µM                              1,2                                10 µM
                                                                                                                              1,0          H2O2
	
                                                                            ##                                              0,8                     ##
                                                                                      ##                                      0,6                            ##
   1,4 **                                                                                                                     0,4
                                                                        Andalusol                                             0,2                Linearol
     1,2                                                                  H2O2 (0,1 mM)                                       0,0 Control
                                                                                                                                                 	
  H2O2 (0,1 mM)
     1,0

     0,8

     0,6

     0,4

     0,2

     0,0
            Control H2O2

	
  
B)	
  

                        MDA (nmol / mg proteína)    *1,0                5 µM                      MDA (nmol / mg proteína)    1,0          *     5 µM
                                                                        10 µM                                                                    10 µM

                                                    0,8 0,8

                                                                        ##                                                                       ##

                                                    0,6 0,6

                                                    0,4 0,4

                                                    0,2 0,2

                                                    0,0           H2O2  Andalusol                                             0,0          H2O2  Lagascatriol
                                                                          H2O2 (1 mM)
                                                         Control                                                                  Control          	
  H2O2 (1 mM)

Figura	
   2.-­-	
   Efecto	
   sobre	
   la	
   peroxidación	
   lipídica.	
   El	
   grado	
   de	
   peroxidación	
   lipídica	
   se	
   cuantifica	
  

midiendo	
   los	
   niveles	
   de	
   MDA	
   en	
   los	
   extractos	
   celulares	
   totales	
   por	
   HPLC.	
   Los	
   resultados	
   se	
  
expresan	
  como	
  nmoles/mg	
  proteína.	
  Los	
  resultados	
  se	
  expresan	
  como	
  media	
  ±	
  Desviación	
  Estándar	
  

de	
   tres	
   experimentos	
   independientes.	
   *	
   p	
   <	
   0,05	
   y	
   **	
   p<	
   0,01	
   versus	
   control;	
   #p<	
   0,05	
   y	
   ##p<	
   0,01	
  

versus	
  H2O2.	
  

                                                    	
  

        La	
   activación	
   de	
   las	
   enzimas	
   antioxidantes	
   es	
   otro	
   de	
   los	
   mecanismos	
   que	
  
explica	
   la	
   acción	
   de	
   los	
   compuestos	
   antioxidantes.	
   Cambios	
   en	
   los	
   patrones	
  
enzimáticos	
   de	
   catalasa	
   (CAT),	
   superóxido	
   dismutasa	
   (SOD),	
   glutation	
   peroxidada	
  
(GPx),	
   glutation	
   reductasa	
   (GR)	
   y	
   hemooxigenasa-­-1	
   (HO-­-1),	
   entre	
   otras,	
   se	
  
traducen	
   en	
   variaciones	
   del	
   balance	
   redox	
   celular,	
   constituyendo,	
   por	
   tanto,	
   un	
  
biomarcador	
   esencial	
   del	
   estrés	
   oxidativo	
   (32,	
   33).	
   Así,	
   con	
   objeto	
   de	
   profundizar	
  
en	
  el/los	
  mecanismos	
  de	
  acción	
  de	
  los	
  diterpenos	
  del	
  presente	
  trabajo,	
  procedimos	
  
a	
  estudiar	
  el	
  papel	
  de	
  estos	
  compuestos	
  en	
  la	
  actividad	
  y	
  expresión	
  de	
  las	
  enzimas	
  
antioxidantes,	
   mediante	
   técnicas	
   espectrofotométricas	
   y	
   de	
   Western-­-blot,	
  
respectivamente.	
   En	
   nuestro	
   trabajo,	
   el	
   tratamiento	
   de	
   las	
   células	
   con	
   H2O2	
  
produce	
   una	
   significativa	
   disminución	
   tanto	
   en	
   la	
   actividad	
   como	
   en	
   la	
   expresión	
  
de	
   las	
   enzimas	
   anteriormente	
   mencionadas.	
   El	
   pretratamiento	
   celular	
   con	
   los	
  
diterpenos	
  de	
  Sideritis	
  produce	
  un	
  aumento	
  de	
  la	
  actividad	
  y	
  de	
  la	
  expresión	
  de	
  las	
  
enzimas	
   antioxidantes	
   endógenas	
   evaluadas	
   (excepto	
   foliol	
   en	
   células	
   PC12	
   y	
  
conchitriol	
   y	
   foliol	
   en	
   células	
   U373-­-MG),	
   comparado	
   con	
   las	
   células	
   expuestas	
   a	
  
H2O2	
  como	
  único	
  tratamiento.	
  En	
  la	
  Figura	
  3,	
  se	
  muestra	
  como	
  ejemplo	
  la	
  actividad	
  
y	
   la	
   expresión	
   para	
   la	
   enzima	
   catalasa	
   y	
   los	
   compuestos	
   andalusol,	
   conchitriol	
   y	
  
lagascatriol.	
  

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