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E.
M.
González--Burgos
&
al.
MDA (nmoles / mg proteína) 5 µM MDA (nmoles / mg proteína) 1,4 ** 5 µM
A)
10 µM 1,2 10 µM
1,0 H2O2
## 0,8 ##
## 0,6 ##
1,4 ** 0,4
Andalusol 0,2 Linearol
1,2 H2O2 (0,1 mM) 0,0 Control
H2O2 (0,1 mM)
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
Control H2O2
B)
MDA (nmol / mg proteína) *1,0 5 µM MDA (nmol / mg proteína) 1,0 * 5 µM
10 µM 10 µM
0,8 0,8
## ##
0,6 0,6
0,4 0,4
0,2 0,2
0,0 H2O2 Andalusol 0,0 H2O2 Lagascatriol
H2O2 (1 mM)
Control Control
H2O2 (1 mM)
Figura
2.--
Efecto
sobre
la
peroxidación
lipídica.
El
grado
de
peroxidación
lipídica
se
cuantifica
midiendo
los
niveles
de
MDA
en
los
extractos
celulares
totales
por
HPLC.
Los
resultados
se
expresan
como
nmoles/mg
proteína.
Los
resultados
se
expresan
como
media
±
Desviación
Estándar
de
tres
experimentos
independientes.
*
p
<
0,05
y
**
p<
0,01
versus
control;
#p<
0,05
y
##p<
0,01
versus
H2O2.
La
activación
de
las
enzimas
antioxidantes
es
otro
de
los
mecanismos
que
explica
la
acción
de
los
compuestos
antioxidantes.
Cambios
en
los
patrones
enzimáticos
de
catalasa
(CAT),
superóxido
dismutasa
(SOD),
glutation
peroxidada
(GPx),
glutation
reductasa
(GR)
y
hemooxigenasa--1
(HO--1),
entre
otras,
se
traducen
en
variaciones
del
balance
redox
celular,
constituyendo,
por
tanto,
un
biomarcador
esencial
del
estrés
oxidativo
(32,
33).
Así,
con
objeto
de
profundizar
en
el/los
mecanismos
de
acción
de
los
diterpenos
del
presente
trabajo,
procedimos
a
estudiar
el
papel
de
estos
compuestos
en
la
actividad
y
expresión
de
las
enzimas
antioxidantes,
mediante
técnicas
espectrofotométricas
y
de
Western--blot,
respectivamente.
En
nuestro
trabajo,
el
tratamiento
de
las
células
con
H2O2
produce
una
significativa
disminución
tanto
en
la
actividad
como
en
la
expresión
de
las
enzimas
anteriormente
mencionadas.
El
pretratamiento
celular
con
los
diterpenos
de
Sideritis
produce
un
aumento
de
la
actividad
y
de
la
expresión
de
las
enzimas
antioxidantes
endógenas
evaluadas
(excepto
foliol
en
células
PC12
y
conchitriol
y
foliol
en
células
U373--MG),
comparado
con
las
células
expuestas
a
H2O2
como
único
tratamiento.
En
la
Figura
3,
se
muestra
como
ejemplo
la
actividad
y
la
expresión
para
la
enzima
catalasa
y
los
compuestos
andalusol,
conchitriol
y
lagascatriol.
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