Page 108 - 79_02
P. 108

  Estandarización	
  de	
  un	
  modelo	
  murino…	
  

	
  
limitación	
  hace	
  de	
  los	
  modelos	
  animales	
  una	
  herramienta	
  necesaria	
  en	
  los	
  estudios	
  
experimentales	
   de	
   la	
   progresión	
   de	
   MC,	
   los	
   cuales	
   aunque	
   no	
   reproducen	
   en	
   su	
  
totalidad	
   las	
   características	
   patológicas	
   expresadas	
   en	
   el	
   hombre	
   (9),	
   permiten	
   el	
  
análisis	
   más	
   detallado	
   de	
   los	
   cambios	
   ocurridos	
   durante	
   la	
   infección	
   cerebral	
   (19,	
  
25).	
   El	
   modelo	
   experimental	
   más	
   aceptado	
   en	
   numerosos	
   laboratorios	
   para	
   el	
  
estudio	
  de	
  la	
  MC	
  es	
  el	
  que	
  utiliza	
  la	
  infección	
  de	
  ratones	
  de	
  la	
  estirpe	
  C57BL/6	
  con	
  
P.	
   berghei	
   ANKA	
   (9,	
   26).	
   Dicho	
   modelo	
   ha	
   sido	
   muy	
   explotado	
   para	
   identificar	
   los	
  
mecanismos	
   implicados	
   en	
   la	
   patogénesis	
   de	
   esta	
   infección	
   cerebral,	
   sin	
   embargo	
  
ha	
   sido	
   poco	
   utilizado	
   para	
   evaluar	
   la	
   eficacia	
   de	
   posibles	
   tratamientos	
  
farmacológicos	
   específicos	
   para	
   malaria	
   cerebral	
   y	
   en	
   terapias	
   de	
   rescate	
   que	
  
prevengan	
   los	
   daños	
   cognitivos	
   ocasionados	
   (27-­-29).	
   Esto	
   es	
   debido	
   a	
   las	
  
diferencias	
   intrínsecas	
   del	
   propio	
   modelo	
   para	
   manifestar	
   los	
   rasgos	
   clínicos	
   que	
  
se	
   desarrollan	
   comúnmente	
   en	
   la	
   malaria	
   cerebral	
   humana,	
   por	
   lo	
   que	
   resulta	
  
difícil	
   establecer	
   estadios	
   claros	
   de	
   evolución	
   durante	
   el	
   avance	
   de	
   la	
   patología,	
  
obstaculizando	
   así	
   la	
   elaboración	
   de	
   protocolos	
   de	
   tratamiento	
   efectivos	
   y	
   la	
  
evaluación	
  clínica	
  y	
  bioquímica	
  del	
  individuo	
  durante	
  y	
  después	
  de	
  la	
  infección	
  (9,	
  
30).	
  

2.	
  MATERIAL	
  Y	
  MÉTODOS	
  

        Todos	
   los	
   experimentos	
   fueron	
   realizados	
   en	
   la	
   Universidad	
   Complutense	
  
de	
  Madrid	
  de	
  acuerdo	
  a	
  las	
  directrices	
  del	
  Consejo	
  Internacional	
  para	
  Animales	
  de	
  
Experimentación.	
  	
  

2.	
  1.	
  Modelo	
  animal	
  e	
  infección	
  experimental	
  	
  

        En	
  todos	
  los	
  ensayos	
  realizados	
  en	
  el	
  presente	
  trabajo	
  se	
  ha	
  utilizado	
  como	
  
modelo	
  experimental	
  de	
  malaria	
  cerebral	
  la	
  infección	
  de	
  ratones	
  macho	
  de	
  la	
  cepa	
  
C57BL/6	
   (Harlan	
   Ibérica,	
   Barcelona,	
   España)	
   de	
   4-­-5	
   semanas	
   de	
   edad	
   con	
   el	
  
parásito	
   Plasmodium	
   berghei	
   (ANKA),	
   el	
   cual	
   es	
   capaz	
   de	
   inducir	
   el	
   desarrollo	
   de	
  
malaria	
   cerebral	
   en	
   los	
   animales	
   infectados	
   en	
   un	
   tiempo	
   de	
   7	
   a	
   14	
   días.	
   En	
   los	
  
grupos	
   experimentales	
   la	
   infección	
   se	
   inicia	
   mediante	
   la	
   inyección	
   intraperitonial	
  
de	
   los	
   ratones	
   con	
   5x106	
   glóbulos	
   rojos	
   infectados	
   con	
   P.	
   berghei	
   (ANKA)	
  
procedentes	
   de	
   un	
   ratón	
   donante	
   de	
   la	
   cepa	
   BALB/c,	
   ya	
   que	
   esta	
   cepa	
   desarrolla	
  
parasitemias	
   sanguíneas	
   más	
   elevadas	
   y	
   permite	
   reducir	
   el	
   número	
   de	
   animales	
  
donantes.	
   A	
   los	
   ratones	
   del	
   grupo	
   control	
   no	
   se	
   les	
   infecta	
   y	
   se	
   les	
   inyecta	
   una	
  
dilución	
  equivalente	
  de	
  eritrocitos	
  sanos	
  de	
  la	
  misma	
  cepa	
  de	
  ratón	
  BALB/c.	
  Dado	
  
que	
   diversos	
   estudios	
   sugieren	
   que	
   los	
   parásitos	
   son	
   incapaces	
   de	
   producir	
  
suficiente	
   ácido	
   paraaminobenzoico	
   (PABA)	
   para	
   sobrevivir	
   tras	
   la	
   infección	
   (31)	
  
se	
  añadió,	
  en	
  el	
  agua	
  de	
  bebida,	
  PABA	
  a	
  una	
  concentración	
  del	
  	
  0,05%.	
  	
  

        	
  

        	
  

                                                                                                                            	
  277	
  

	
  
   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113