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VOL. 76 (4), 435-457, 2010 CARACTERIZACIÓN FARMACOLÓGICA Y ANÁLISIS FUNCIONAL…
oxotremorina-M) induzcan respuestas con potencias y magnitudes má-
ximas notablemente dispares, resulta indicativo de la heterogeneidad
de los nAChRs expresados por las células cromafines de la rata. Esta
heterogeneidad de nAChRs, quedó confirmada por los resultados ob-
tenidos con metilicaconitina, un antagonista de los nAChRs formados
por las subunidades a7 o a9a10 a concentraciones inferiores a 100 nM,
y de los constituidos por las subunidades a3 y a4 a concentraciones
superiores a la referida.
Nuestros resultados son congruentes con los publicados por otros
cuatro grupos de investigación (20, 21, 24, 25, 39) que, basándose en
evidencias tanto de tipo funcional como molecular han propuesto que
los nAChRs predominantes en las células cromafines de la rata serí-
an los de tipo ganglionar (a3ß4(a5) y a3ß2(a5)) y el a7. Debemos se-
ñalar que los resultados funcionales que sugieren la expresión de
nAChRs a7 en las células cromafines de rata se han basado casi ex-
clusivamente en la utilización de a-bungarotoxina, una toxina que blo-
quea con elevada potencia tanto los nAChRs a7 (CI50 de 1,9 nM; (38))
como los formados por las subunidades a9 y a10 (CI50 de 6-64 nM;
(5, 6, 9, 38)). Existe, no obstante, una particularidad del efecto blo-
queante de esta toxina que puede ser de utilidad para identificar la
diana sobre la que actúa: la a-bungarotoxina se combina con el nAChR
a7 de manera esencialmente irreversible (40) mientras que su efecto
sobre los nAChRs a9a10 es característicamente revertido en pocos mi-
nutos de lavado (5, 6, 9).
La a-bungarotoxina bloqueó parcialmente (~ 30%) y con una CI50
de 68,8 nM las corrientes inducidas por acetilcolina en las células
cromafines de la rata. Además, el efecto bloqueante fue parcialmen-
te reversible. Por otro lado, el hecho de que el GTS-21, un agonista
selectivo de los nAChRs a7 (31), fuera ineficaz para inducir una res-
puesta de corriente en la práctica totalidad de las células estudiadas,
permite descartar a los nAChRs a7 como la principal diana de la ac-
ción de la metilicaconitina o de la a-bungarotoxina en nuestra pre-
paración.
La evidencia farmacológica definitiva de la presencia de los
nAChRs a9a10 en las células cromafines de rata se obtuvo mediante
el empleo de la a-RgIA, una toxina que presenta una elevada poten-
cia (CI50 ~ 5 nM) para bloquear los nAChRs a9a10 de la rata tanto na-
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