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ÁGUEDA GONZÁLEZ-RODRÍGUEZ Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.

la caspasa-3 como de la caspasa-8 mediante Western blot. En ambos
casos, observamos que en los hepatocitos S6K1+/+ aparecen los frag-
mentos activos de estas caspasas tras el tratamiento con TNFa en
presencia de Actinomicina D y con Jo2, y que no ocurría así con los
hepatocitos deficientes en S6K1.

A continuación, analizamos los niveles de expresión de otras
proteínas implicadas en la ruta apoptótica mediada por receptores
de muerte. La activación de Bid se produce como consecuencia de
su proteolisis debido a la activación de la caspasa-8. En consecuen-
cia, aparece un fragmento truncado de Bid (tBid) de 15 KDa con
gran actividad proapoptótica. Como ocurría anteriormente, los ni-
veles de expresión de Bid están disminuidos en los hepatocitos
S6K1–/– comparado con los hepatocitos S6K1+/+. A la hora de analizar
tBid, observamos que en los hepatocitos de genotipo salvaje aparece
un aumento en los niveles de expresión de tBid ante el estímulo de
muerte. Sin embargo, no ocurre lo mismo en las células S6K1–/–,
donde tBid no aparece tras el tratamiento (Figura 4C). Finalmente,
estudiamos posibles cambios en Bcl-xL en las mismas condiciones
experimentales. En los hepatocitos de genotipo salvaje, los niveles de
Bcl-xL disminuyen significativamente tras el tratamiento con TNFa
en presencia de Actinomicina D y con Jo2. Sin embargo, la expresión
de Bcl-xL no se modifica tras la inducción de apoptosis en los hepa-
tocitos deficientes en S6K1.

Nuestros resultados indican que la falta de S6K1 tiene como
consecuencia una menor expresión de Bid. Esto conlleva la ausencia
de su forma activa. Asimismo, la inducción de la apoptosis no pro-
voca activación de la caspasa-8. Paralelamente, se mantienen los
niveles de Bcl-xL ante dichos estímulos apoptóticos. Por tanto, po-
dríamos decir que en los hepatocitos deficientes en S6K1 existe un
balance a favor de las proteínas antiapoptóticas frente a las proteí-
nas proapoptóticas.

Estudio de la apoptosis inducida por la deprivación
de factores tróficos

Estudios previos en nuestro laboratorio demostraron que la de-
privación de factores tróficos inducía muerte celular por apoptosis

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