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ÁGUEDA GONZÁLEZ-RODRÍGUEZ Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.

celulares de hepatocitos inmortalizados a partir de hígados de ratones neonatos de
genotipo salvaje (S6K1+/+) y deficientes en S6K1 (S6K1–/–). Dichas células se han
sometido a dos protocolos de inducción de muerte celular por apoptosis: acti-
vación de receptores de muerte (TNFR y Fas) y retirada de factores tróficos del
medio de cultivo. Nuestros resultados indican que la falta de S6K1 confiere protec-
ción frente a la apoptosis inducida por activación de receptores de muerte. Este
fenómeno se debe a que la expresión de la proteína pro-apoptótica Bid está dismi-
nuida, la caspasa-8 no se activa y no se produce la degradación de FLIP ni trun-
camiento de Bid en respuesta a TNF y Jo2. De hecho, la falta de S6K1 protege del
daño hepático fulminante producido por la inyección de concanavalina A. Asimis-
mo, la pérdida de S6K1 en los hepatocitos evita la apoptosis inducida por la reti-
rada de factores tróficos. Esto es debido a que en ausencia de S6K1 no se inicia
la retroalimentación negativa mediada por la actividad serina quinasa de esta pro-
teína y, en consecuencia, los hepatocitos S6K1–/– mantienen activada la ruta IRS-
1/PI3-quinasa que conduce a la activación de las quinasas Akt y ERK que mantie-
nen la supervivencia celular. Nuestros resultados sugieren que la resistencia de los
hepatocitos deficientes en S6K1 a la muerte celular por apoptosis podría explicar
la resistencia a los compuestos inhibidores de mTOR en el tratamiento de diferen-
tes tipos de cáncer, como el hepatocarcinoma.

Palabras clave: Apoptosis.—Hepatocito.—TNF.—Retirada de suero.—Daño
hepático.

ABSTRACT

Role of S6K1 in the balance between survival and cell death in the liver

The mTOR/S6K1 signaling pathway controls proliferation and cell growth.
Insulin, IGF-I, EGF are trophic factors that elicit survival effects in hepatocytes.
These molecules activate mTOR/S6K1 by acting through tyrosine kinase receptors.
The aim of this study was to investigate whether S6K1 deficiency alters the balance
survival/cell death in hepatocytes. For this goal, we have generated immortalized
hepatocyte cell lines from neonatal wild-type and S6K1–/– deficient mice. Apoptosis
has been induced in these cells by activating the death receptor pathway or,
alternatively, by growth factors deprivation. Our results indicate that the lack of
S6K1 in hepatocytes protects from apoptosis induced by the activation of death
receptors (TNFR and Fas). In fact, in S6K1–/– hepatocytes the pro-apoptotic protein
Bid is down-regulated and its active proteolitic fragment is absent in response
to TNF or Jo2. Moreover, neither caspase-8 is activated nor FLIP is degraded
upon TNF or Jo2 treatment. In vivo, S6K1-deficient mice are protected against
Concanavalin A-induced hepatic failure. Deprivation of growth factors induces
apoptosis in wild-type, but not in S6K1–/– hepatocytes. This is due to the lack of
the negative feed-back that increases IRS-1 serine phosphorylation and inhibits
PI3-kinase/Akt and MAPK survival molecular pathways. Consequently, there is a
sustained activation of Akt and MAPK in the absence of trophic factors and S6K1-

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