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VOL. 71 (2), 439-449, 2005 ACTIVACIÓN DE CaMKII POR UDP

FIGURA 2. (A) Los productos de PCR del receptor P2Y obtenidos a 7 y 14 días de
cultivo, se separaron en geles de agarosa al 2 %. Se hicieron controles con agua (H2O)
en lugar de cDNA molde y controles adicionales en ausencia de transcriptasa inversa
(-RT). Como control positivo de la expresión de receptores P2Y6 se emplearon extrac-
tos de RNA de cultivos de astrocitos (Ast). M = marcador de 100 pb (n = 3 cultivos
diferentes). (B) Las células en cultivo (14 DIV) se cargaron con la sonda Fura-2 y se
estimularon con UDP y UTP a 100 µM durante 30 segundos cada uno, dejando 5
minutos de recuperación entre aplicaciones consecutivas. Las células se estimularon
al final del experimento con KCl 30 mM para comprobar su estado funcional. Los
incrementos de calcio intracelular se calcularon a partir del ratio F340/F380 con la
ecuación de Grynkievicz. (C) Los diagramas de barras muestran la media ± SEM del
porcentaje de células que responden a UDP 100 µM, medidas en los días 10, 14, 17
y 21 de cultivo. Diferencias significativas respecto al control correspondiente al por-
centaje de células que responden a cada nucleótido en el día 10 de cultivo: **P<0.01,

***P<0.001. N= 4-6 cultivos; 100-200 células por estadío y cultivo.

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