Page 52 - Demo

174ANALESRANFwww.analesranf.coman. R. acad. Farm.vol. 91. n%u00ba2 (2025) %u00b7 pp. 173-192KEywoRdS SARS-CoV-2DNA vaccineprotein S Protein NMurine modelpPALFurin1. INtRodUCCI%u00f3NLas vacunas se consideran el m%u00e9todo m%u00e1s eficaz para controlar la pandemia de COVID-19 yhan contribuido a la recuperaci%u00f3n de la econom%u00eda global. Sin embargo, la eficacia de larespuesta inmune protectora inducida porestas vacunas frente a las variantes de preocupaci%u00f3n (VOC, por sus siglas en ingl%u00e9s) presenta limitaciones. Las nuevas VOC muestranuna elevada tasa de mutaci%u00f3n en el dominiode uni%u00f3n al receptor (RBD) y en las secuenciasdel dominio N-terminal de la glicoprote%u00edna espicular (S) del SARS-CoV-2. La inmunidad basada en anticuerpos frente a estas VOC esmenos eficaz en comparaci%u00f3n con la cepa original Wuhan-Hu-1. No obstante, la respuestade los linfocitos T frente a estas variantes permanece robusta.Los linfocitos T reconocen m%u00e1s ep%u00edtopos dela prote%u00edna S que los anticuerpos. Adem%u00e1s, lasrespuestas de c%u00e9lulas T no decrecen tan r%u00e1pidamente como las de los anticuerpos, por loque proporcionan una protecci%u00f3n m%u00e1s eficazfrente a variantes emergentes. Las vacunasque expresan la prote%u00edna S derivada de variantes como %u00d3micron no mejoran necesariamentela eficacia en comparaci%u00f3n con la prote%u00edna Soriginal. Esto sugiere que adaptar el ant%u00edgenoThe non-replicative DNA vaccine, pPAL-S + pPAL-N,free of antibiotic resistance genes, confers completeprotection in mice against SARS-CoV-2Pedro J. Alcolea, Jaime Larraga et al.vacunal a la forma m%u00e1s reciente de S no garantiza una mejora en la eficacia. El desarrollo de vacunas altamente eficaces paraprevenir la COVID-19 sigue siendo una necesidad a nivel global. En el futuro, ser%u00e1n necesarias vacunas capaces de inducir una respuestacelular adecuada para minimizar el impactode nuevas variantes sobre los sistemas sanitarios.Las vacunas de ADN, utilizadas en medicinaveterinaria, inducen respuestas inmunes protectoras espec%u00edficas frente a pat%u00f3genos. Estasvacunas son f%u00e1cilmente modificables, lo quepermite ensayar r%u00e1pidamente m%u00faltiples candidatos vacunales frente a nuevas cepas v%u00edricas. Una de las ventajas de las vacunas de ADNes que su producci%u00f3n puede escalarse f%u00e1cilmente. Adem%u00e1s, estas vacunas son termoestables, lo cual elimina la necesidad de cadenade fr%u00edo para su almacenamiento a largo plazoy distribuci%u00f3n global. Esta caracter%u00edstica resulta particularmente ventajosa para pa%u00edsesen desarrollo. Actualmente se est%u00e1n ensayando varios candidatos de vacunas de ADNfrente a la COVID-19 en ensayos cl%u00ednicos, aunque la mayor%u00eda incluye genes de resistencia aantibi%u00f3ticos como marcador de selecci%u00f3n ensu proceso de fabricaci%u00f3n.abStRaCtThe vaccines currently in use against SARS-CoV-2 have contributed to thecontrol of the COVID-19 pandemic. However, the high mutation rate,especially in the spicular (S) glycoprotein, is promoting the emergence ofnew variants. The exclusive use of this antigen could limit vaccine efficacy.This study presents a candidate DNA vaccine encoding S and N proteins,integrated into the non-replicative expression plasmid in mammalian cellspPAL. This plasmid does not contain antibiotic resistance genes, employinginstead an alternative marker for selection. The S gene sequence wasmodified to avoid furin cleavage (Sfs). In C57BL/6J mice immunizedintramuscularly by a primovaccination-booster regimen and in vivoelectroporation with pPAL-Sfs + pPAL-N, robust humoral and cellularimmune responses were observed. This immunization conferred completeprotection in K18-hACE2 mice against a lethal dose (10%u2075 PFU) of SARS-CoV2. Viral replication was completely controlled in lungs, brain and heart.Therefore, pPAL-Sfs + pPAL-N represents a promising DNA vaccine forprotection against COVID-19.