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J. Cuadrado, C. Cuadrado, B. Cuadrado

Tabla 2. Concentración de células diana por ml de disolución a distintas diluciones.

Minutos Horas Número log Células diana (Salmonella spp) Células diana (Salmonella
células/muestra /ml de la dilución 1/4 spp) /ml de la dilución 1/3
0 0 procedente de 25g-ml de procedente de 25g-ml de
30 0,5 alimento alimento
60 1
90 1,5 10 Menos de 10 Menos de 10
120 2
180 3 2 0,3 Menos de 10 Menos de 10
240 4
300 5 4 0,6 Menos de 10 Menos de 10
360 6
420 7 8 0,9 Menos de 10 Menos de 10
480 8
540 9 16 1,2 Menos de 10 Menos de 10
600 10
660 11 64 1,8 Menos de 10 Menos de 10
720 12
840 14 256 2,4 Menos de 10 Menos de 10
960 16 1024 3,01 Menos de 102 Menos de 102
4096 3,61 Menos de 102 Menos de 102
16384 4,21 Menos de 103 Menos de 103
65536 4,81 Menos de 103 Menos de 103
262144 5,41
1048576 6,02 2,6x103 3,4x103
4194304 6,62 1x104 1,3x104
16777216 7,22 4,1x104 5,5x104
268435456 8,42 1,6x105 2,2x105
4,3x109 9,63 2,6x106 3,5x106
4,3x107 5,7x107

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN -Adelanto en tiempo de los resultados analíticos.
-Menores necesidades de equipos (incubadores) y
3.1. Resultados fungibles (por ejemplo bolsas de stomacher más
pequeñas).
Los resultados obtenidos en el experimento evidencian -Procesamiento de noventa y seis muestras por
que para alimentos como la leche y el paté diluidos a 1/3 y termociclado.
1/4, la concentración bacteriana para un mínimo de 9 horas -Actuación de un único analista.
de incubación facilita la detección por PCR del ADN Otro tipo de experimentos se podrían realizar en base a
diana, con valores de ufc/ml superiores a 1x103. conseguir determinadas mejoras distintas o mayores a las
aquí descritas, como barajar el disminuir el tiempo de
Las muestras analizadas con dilución 1/10, propia de incubación sin que los resultados se vean afectados, u
los métodos tradicionales de investigación, han tenido organizar la secuencia de trabajo para que con pequeños
similares resultados. cambios como el de bajar la dilución se consiga mayor
eficacia analítica
3.2. Discusión.
5. REFERENCIAS
El realizar una dilución inferior a 1/10 no contradice la
ISO 22174 ya que el fin de incrementar el número de 1. Gattuso A et al. Optimization of a Real Time PCR based
células del patógeno se cumple y permite la detección de method for the detection of Listeria monocytogenes
un número bajo de microorganismos diana al incrementar in pork meat. Int J Food Microbiol. 2014 Aug
estos con el enriquecimiento. 1;184:106-8.

4. CONCLUSIONES 2. Margie D. Lee1, Amanda Fairchild1. PCR Methods in
Foods. Editors: John Maurer. 2006 Chapters 3 Sample
Esta sencilla labor conlleva repercusiones como: de Preparation for PCR.
-Menor consumo de reactivos (caldos
enriquecimiento). @Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
-Menos horas de incubación.

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