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Enrichment-improvement in the effectiveness of the implementation of the polymerase chain reaction of pathogens in food

-Determinar la presencia o ausencia de Salmonella spp o no contaminada.

en 25 ml de leche de lactantes, utilizando BPW como -Determinación de Salmonella spp en una muestra de
medio de enriquecimiento con el fin de conocer si la paté de cerdo (25g) dopada con 4 ufc/25 g de Salmonella
muestra natural está contaminada o no. typhimurium NCTC 12023, con 225 ml de BPW.

-Determinar la presencia o ausencia de Salmonella spp -Determinación de Salmonella spp en una muestra de
en 25 ml de leche de lactantes, sin añadir BPW, dopada paté de cerdo (25g) dopada con 4 ufc/25 g de Salmonella
con 4 ufc de Salmonella typhimurium NCTC 12023 /25ml typhimurium NCTC 12023 (LD del método en el
(Límite de detección (LD) del método en el laboratorio) y laboratorio), con 50 ml de BPW y por triplicado.
realizando tres determinaciones iguales.
2.6. Obtención de datos y conclusiones
-Determinar la presencia o ausencia de Salmonella spp

en 25 ml de leche de lactantes, tras añadir a la muestra 225 Los ensayos los realiza un analista distinto al que dopa.
ml de BPW, con el mismo dopaje y solo en una unidad de En todas las placas sembradas de las muestras dopadas, el
muestra. crecimiento de colonias sospechosas de Salmonella spp ha

-Determinar la presencia o ausencia de Salmonella spp sido abundante.- Determinación de Salmonella spp en una
en 25 ml de leche de lactantes, tras añadir a la muestra 75 muestra de paté de cerdo (25g) dopada con 4 ufc/25 g de
ml de BPW, con el mismo dopaje y en dos unidades. Salmonella typhimurium NCTC 12023, con 75 ml de BPW
y por duplicado.
-Determinación de Salmonella spp en una muestra

natural de 25 g de paté de cerdo, para ver si la muestra está

Tabla 1. Alimentos dopados a distintas diluciones.

Matriz Peso Enriquecimiento con Nº Dopaje en Resultado

en g BPW en ml ensayos Ufc/25 g

225 1 0 Ausencia

Leche 25 225 1 4 Presencia
deshidratada 0 3 4 3 Presencias

lactantes

75 2 4 2 Presencias

225 1 0 Ausencia

Paté de cerdo 25 225 1 4 Presencia
50 3 4 3 Presencias

75 2 4 2 Presencias

Como se ve en la Tabla 1, las muestras naturales sin patógeno diana en un mililitro de caldo para a partir de ahí
dopar resultaron negativas a Salmonella spp, y en el resto realizar la extracción del ADN, considerando la tasa de
(las dopadas) se dio la presencia de Salmonella spp, crecimiento de Salmonella spp de 2 (60/30) (4) podemos
apareciendo así en todas las muestras menos diluidas. Si se establecer la Tabla 2 (16):
realiza el cálculo del número teórico de células del

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