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Propuesta
biotecnológica
para
el
tratamiento
del
cáncer
de
cérvix
uterino…
--grupo
control
--grupo
tratado
con
IL--2
--grupo
tratado
con
liposomas
transportadores
de
IL--2
El
tratamiento
se
aplicó
diariamente,
durante
5
días,
después
de
los
cuales
se
sacrificó
a
los
animales
y
se
realizó
una
inspección
minuciosa.
Se
cuantificaron
los
tumores,
se
extrajeron
y
se
calculó
la
masa
tumoral
total.
2.3.4.
Evaluación
del
efecto
protector
de
los
liposomas
con
IL--2
frente
a
los
posibles
efectos
adversos
causados
por
IL--2
libre
(no
transportada)
Se
emplean
los
mismos
grupos
de
ratones
del
estudio
anterior.
Después
de
sacrificarles,
se
realiza
una
inspección
minuciosa
para
evaluar
los
posibles
efectos
adversos
visibles
derivados
del
tumor
(grupo
control),
del
tratamiento
con
IL--2
libre
y
del
tratamiento
con
IL--2
transportado
en
liposomas.
2.3.5.
Evaluación
del
efecto
de
los
liposomas
con
IL--2
sobre
las
células
tumorales.
Para
la
observación
de
los
posibles
cambios
morfológicos
de
las
células
de
los
tumores
inducidos
en
los
ratones,
debido
al
tratamiento
con
liposomas
con
IL--
2,
se
sacrificaron,
lotes
de
ratones
después
de
una
y
dos
horas
de
la
administración
de
los
liposomas
con
IL--2.
Los
tumores
extraídos
de
los
ratones
sacrificados
fueron
fijados
con
glutaraldehído
al
2.5%
durante
1
hora
y
postfijados
con
solución
Osmio--Milloning
al
1%
durante
1
hora.
Las
muestras
fueron
deshidratadas
y
embebidas
en
Epon®
para
proceder
a
cortar
secciones
finas
de
los
tumores
que
se
colocan
en
rejillas
de
cobre
recubiertas
con
Formvar
y
se
contrastan
con
citrato
de
plomo
para
su
evaluación
por
microscopía
electrónica
de
transmisión
(microscopio
electrónico
JEOL--JEM--1010,
JEOL
USA,
Inc.,
MA,
USA).
2.4
Estudios
de
estabilidad
física
de
los
liposomas
en
el
marco
de
la
preformulación
del
medicamento
biotecnológico.
Para
la
evaluación
de
la
estabilidad
física
de
los
liposomas,
se
procedió
a
realizar
la
medición
inicial
de
su
tamaño
y
su
complejidad
en
el
citómetro
de
flujo
(16),
para
después
analizar
sus
posibles
cambios
físicos
debidos
a
la
exposición
a
diferentes
causas
de
inestabilidad
durante
un
determinado
periodo
de
tiempo.
Los
cambios
en
el
tamaño
y
la
complejidad
de
los
liposomas
se
determinaron
mediante
la
evaluación
de
las
diferencias
entre
los
histogramas
obtenidos
en
la
citometría
para
el
tamaño
y
la
conformación
de
los
liposomas
recién
preparados
y
tras
el
almacenamiento.
Se
utilizó
la
estadística
de
Kolmogorov--Smirnove
(K--S),
de
forma
que,
un
valor
de
D
(Diferencia)
de
0
indicaría
un
total
solapamiento
y
por
tanto
una
total
igualdad
de
los
histogramas,
y
un
valor
de
1
indicaría
que
ningún
punto
está
en
concordancia,
por
lo
que
los
histogramas
serían
totalmente
diferentes.
Para
establecer
la
existencia
de
una
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