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Rosalva
Rangel-­-Corona
&
al.

una
relación
molar
1:1.
La
mezcla
de
lípidos
(10µmol)
fue
disuelta
en
cloroformo,

el
disolvente
fue
evaporado
utilizando
un
flujo
de
nitrógeno
a
presión
reducida,
los

liposomas
se
formaron
por
la
hidratación
de
la
película
de
lípidos
en
solución

amortiguadora
de
fosfatos
(PBS)
(liposomas
vacíos)
o
con
IL-­-2
(R&D
Systems,

USA)
(100
UI/mL)
en
PBS
(liposomas
con
IL-­-2)
mediante
tres
ciclos
de
sonicación

(sonicador
Lab
Supply
G112SOI)
de
5
segundos
separados
por
períodos
de

descanso
de
30
segundos.
Los
liposomas
formados
fueron
lavados
por

sedimentación
a
200.000g
durante
40
minutos
en
PBS,
y
después
fueron

resuspendidos
en
PBS.

2.2
Aspecto
de
los
liposomas
con
IL-­-2:
Microscopía
electrónica

Para
determinar
la
morfología
y
tamaño
de
nuestro
sistema
transportador

se
recurrió
a
la
microscopía
electrónica.
Los
liposomas
con
IL-­-2
se
colocaron
en

rejillas
de
cobre
con
200
mallas
que
estaban
cubiertas
con
Formvar,
se
incubaron

durante
20
minutos
a
temperatura
ambiente
y
después
se
eliminó
el
líquido
por

decantación
con
papel
filtro.
Posteriormente,
las
muestras
se
tiñeron
con
una

solución
acuosa
de
acetato
de
uranilo
al
4%
durante
5
minutos,
se
eliminó
el

exceso
de
líquido
y
se
dejaron
secar
durante
24
horas.

2.3.
Evaluación
in
vivo,
en
animales
de
experimentación

2.3.1.
Animales
de
experimentación

Se
utilizaron
ratones
hembra
de
la
cepa
CBA/ca
de
18
a
24
meses
de
edad.

Se
mantuvieron
en
cajas
especiales
con
ambiente
controlado
(esterilidad
y
21ºC),

en
grupos
de
cuatro,
y
se
les
suministró
alimento
y
agua
ad
libitum,
según
los

protocolos
aprobados
por
la
Comisión
de
Ética
para
animales
de
experimentación

de
la
UNAM
(Universidad
Nacional
Autónoma
de
México),
la
cual
cumple
con
los

códigos
para
el
cuidado
y
uso
de
animales
de
experimentación.

2.3.2.
Inducción
de
tumores
en
ratones

Para
el
modelo
de
inducción
de
tumores
y
evaluación
del
efecto
biológico
de

los
liposomas
con
IL-­-2
obtenidos
se
utilizó
la
técnica
desarrollada
por
Rangel
et
al.

(14).
Brevemente,
se
utilizaron
ratones
singénicos
de
la
cepa
CBA,
se

inmunodeprimieron
utilizando
hidrocortisona,
se
les
inyectaron
las
células

tumorales
de
la
línea
INBL,
se
continuó
la
inmunodepresión
en
un
tiempo
total
de

seis
semanas.
Asumiendo
que
cada
tumor
es
similar
a
una
esfera,
se
calculó
la
masa

tumoral
de
cada
uno
con
la
fórmula
4/3
pr3
y
se
sumó
la
masa
tumoral
total.

Además
se
evaluaron
los
efectos
adversos
visibles
generados
por
la
masa
tumoral.

2.3.3.
Evaluación
del
efecto
de
los
liposomas
con
IL-­-2
sobre
el
tamaño
de
la

masa
tumoral.

Una
vez
inducidos
los
tumores
en
los
ratones
y
determinado
su
tamaño

inicial,
se
establecieron
3
grupos:

182