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B.	
  MARTÍN	
  &	
  col	
  

	
  
        Se	
   estudió	
   la	
   influencia	
   de	
   la	
   concentración	
   de	
   sonda	
   indicadora	
   y	
  

conjugado	
   enzimático	
   ya	
   que	
   el	
   ruido	
   se	
   debe	
   fundamentalmente	
   a	
   la	
   adsorción	
  
inespecífica	
   de	
   ambas	
   especies.	
   La	
   primera	
   se	
   encuentra	
   sobre	
   la	
   superficie	
  
electródica	
   durante	
   la	
   etapa	
   de	
   hibridación	
   heterogénea	
   siendo	
   probable	
   su	
  
absorción	
   al	
   electrodo	
   a	
   través	
   de	
   sus	
   bases	
   nitrogenadas.	
   Algo	
   similar	
   puede	
  
ocurrir	
   con	
   la	
   enzima	
   añadida	
   al	
   medio	
   catalizar	
   la	
   conversión	
   del	
   sustrato	
  
enzimático	
  a	
  producto	
  electroactivo.	
  	
  

        Se	
   estudiaron	
   conjuntamente	
   tres	
   niveles	
   de	
   concentración	
   de	
   sonda	
  
indicadora	
   (2,	
   1	
   y	
   0,5	
   µM)	
   y	
   cuatro	
   niveles	
   de	
   enzima	
   ALP-­-Strp	
   (4,3·10-­-3	
   g/L;	
  
2,15·10-­-3	
  g/L;	
  1,075·10-­-3	
  g/L	
  y	
  5,375·10-­-4	
  g/L).	
  	
  

        La	
   intensidad	
   del	
   blanco	
   se	
   hace	
   menor	
   conforme	
   disminuye	
   la	
  
concentración	
   de	
   sonda	
   indicadora	
   y	
   de	
   enzima	
   siendo	
   el	
   	
   efecto	
   de	
   ésta	
   más	
  
pronunciado	
  (Figura	
  13).	
  

        Como	
  se	
  observa	
  en	
  la	
  Figura	
  14,	
  el	
  blanco	
  dio	
  la	
  mínima	
  señal	
  en	
  presencia	
  
de	
  la	
  menor	
  concentración	
  de	
  enzima	
  estudiada	
  (5,375·10-­-4	
  g/L).	
  Sin	
  embargo,	
  en	
  
estas	
   condiciones	
   la	
   señal	
   del	
   blanco	
   no	
   se	
   vio	
   afectada	
   por	
   la	
   concentración	
   de	
  
sonda	
   indicadora.	
   Según	
   estos	
   resultados,	
   el	
   efecto	
   de	
   la	
   sonda	
   indicadora	
   en	
   el	
  
ruido	
  parece	
  menor	
  que	
  el	
  de	
  la	
  enzima.	
  

         1,E-06 2 µM de indicadora            0,537 mg/L  1,E-06 1 µM de indicadora                                                     0,537 mg/L
         8,E-07                               1,075 mg/L  8,E-07                                                                        1,075 mg/L
                                              2,15 mg/L                                                                                 2,15 mg/L
         6,E-07                               4,3 mg/L                             6,E-07                                               4,3 mg/L
I (A)
                                                                              I (A)0,6 0,84,E-07                                        0,6 0,8
         4,E-07

         2,E-07                                           2,E-07

         0,E+00       0,2 0,4                             0,E+00                           0,2 0,4
                   0              E (V)                             0                                   E (V)

                                    I (A)  1,E-06                                          0,537 mg/L
                                                       0,5 µM de indicadora                1,075 mg/L
                                                                                           2,15 mg/L
                                           8,E-07                                          4,3 mg/L

                                           6,E-07

                                           4,E-07

                                           2,E-07

                                           0,E+00       0,2 0,4 0,6                        0,8
                                                     0               E (V)

                                                                                                                                                    	
  

Figura	
  13.-­-	
  Influencia	
  de	
  la	
  adsorción	
  inespecífica	
  de	
  la	
  enzima	
  en	
  el	
  ruido	
  de	
  fondo.	
  

	
  

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