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B.
MARTÍN
&
col
Se
estudió
la
influencia
de
la
concentración
de
sonda
indicadora
y
conjugado
enzimático
ya
que
el
ruido
se
debe
fundamentalmente
a
la
adsorción
inespecífica
de
ambas
especies.
La
primera
se
encuentra
sobre
la
superficie
electródica
durante
la
etapa
de
hibridación
heterogénea
siendo
probable
su
absorción
al
electrodo
a
través
de
sus
bases
nitrogenadas.
Algo
similar
puede
ocurrir
con
la
enzima
añadida
al
medio
catalizar
la
conversión
del
sustrato
enzimático
a
producto
electroactivo.
Se
estudiaron
conjuntamente
tres
niveles
de
concentración
de
sonda
indicadora
(2,
1
y
0,5
µM)
y
cuatro
niveles
de
enzima
ALP--Strp
(4,3·10--3
g/L;
2,15·10--3
g/L;
1,075·10--3
g/L
y
5,375·10--4
g/L).
La
intensidad
del
blanco
se
hace
menor
conforme
disminuye
la
concentración
de
sonda
indicadora
y
de
enzima
siendo
el
efecto
de
ésta
más
pronunciado
(Figura
13).
Como
se
observa
en
la
Figura
14,
el
blanco
dio
la
mínima
señal
en
presencia
de
la
menor
concentración
de
enzima
estudiada
(5,375·10--4
g/L).
Sin
embargo,
en
estas
condiciones
la
señal
del
blanco
no
se
vio
afectada
por
la
concentración
de
sonda
indicadora.
Según
estos
resultados,
el
efecto
de
la
sonda
indicadora
en
el
ruido
parece
menor
que
el
de
la
enzima.
1,E-06 2 µM de indicadora 0,537 mg/L 1,E-06 1 µM de indicadora 0,537 mg/L
8,E-07 1,075 mg/L 8,E-07 1,075 mg/L
2,15 mg/L 2,15 mg/L
6,E-07 4,3 mg/L 6,E-07 4,3 mg/L
I (A)
I (A)0,6 0,84,E-07 0,6 0,8
4,E-07
2,E-07 2,E-07
0,E+00 0,2 0,4 0,E+00 0,2 0,4
0 E (V) 0 E (V)
I (A) 1,E-06 0,537 mg/L
0,5 µM de indicadora 1,075 mg/L
2,15 mg/L
8,E-07 4,3 mg/L
6,E-07
4,E-07
2,E-07
0,E+00 0,2 0,4 0,6 0,8
0 E (V)
Figura
13.--
Influencia
de
la
adsorción
inespecífica
de
la
enzima
en
el
ruido
de
fondo.
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