Page 94 - 74_03
P. 94
T. PERIS CONEJERO Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
OBJETIVO
En trabajos anteriores (5-10) hemos estudiado la influencia de
algunos factores fisicoquímicos sobre la cinética de las reacciones
implicadas en las técnicas inmunoanalíticas, así como una justifica-
ción teórica de la ecuación de cuatro parámetros (11). En este caso
pretendemos analizar la influencia de la temperatura sobre las grá-
ficas de calibración obtenidas en el caso concreto de la IGF I, tra-
tando de utilizar Ec. 1 y Ec. 2 para justificar y asignar un sentido
fisicoquímico a las variaciones encontradas.
MATERIAL Y MÉTODOS
Reactivos
1. Tubos recubiertos de anticuerpos frente a IGF-I.
2. Disoluciones patrones de IGF-I.
3. Disolución de anticuerpos frente a IGF-I marcados con 125I.
Todos los reactivos usados estaban incluidos en el kit IGF-I IRMA
DSL 2800 suministrado por DSL.
Instrumentos
LKB Gammamaster Automatic Gamma Counter.
Procedimiento Experimental
A cada tubo recubierto se añadieron 50 µL de disolución patrón
y 200 µL de anticuerpo marcado, y se dejaron en reposo durante
dos horas en baño termostático a distintas temperaturas. Transcurri-
do este tiempo, los tubos se lavaron y se midió su actividad en el
contador.
372
