Page 42 - 73_01

MARIANO ESTEBAN RODRÍGUEZ AN. R. ACAD. NAC. FARM.

En un estudio posterior publicado en el PNAS del mismo año (5),
Fire-Mello aportaron evidencia de que el mRNA es el sitio de acción
del dsRNA por reconocimiento de las cadenas complementarias y que
se degrada antes de su traducción en proteínas. También demostra-
ron cómo el dsRNA actúa de forma catalítica sobre el mRNA homólo-
go mediante la interacción de una molécula lineal de RNA aportado
por el dsRNA y el mRNA. Además indicaron que el RNAi puede servir
como sistema táctico de defensa en organismos inferiores, de forma
similar al sistema de defensa de los interferones en mamíferos.

En poco tiempo la presencia del RNAi fue rápidamente documen-
tada en muchos otros organismos incluyendo la mosca del vinagre,
tripanosomas, plantas, planaria, hidra y el pez cebra (6). Así pues, se
considera al RNAi como un sistema que ha revolucionado la biología
celular y se ha extendido a otras muchas áreas. La revista Science,
en su edición de diciembre de 2002, consideró al RNAi como la mo-
lécula revelación del año (7), y la revista Nature dedicó en 2004 un
número especial al RNAi (8).

MECANISMO DE SILENCIAMIENTO GÉNICO POR dsRNA

Poco después del descubrimiento del RNAi se demostró en plan-
tas que el proceso de silenciamiento PTGS se correlacionaba con la
presencia de moléculas pequeñas de RNA (de unos 25 nucleótidos)
y que este RNA contiene secuencias sentido y antisentido, por lo que
se propuso que este RNA pequeño es el responsable de PTGS (9).
Varios grupos de investigación se lanzaron al estudio bioquímico del
proceso de RNAi, demostrando con embriones de Drosophila que el
dsRNA es procesado a un tamaño de 21-23 nucleótidos, semejante
al descrito en plantas (10, 11). Se propuso que este dsRNA, llamado
RNA pequeño de interferencia (small-interfering RNA, siRNA) actúa
como guía para la rotura del mRNA. En estudios posteriores, Fire-
Mello establecieron por ensayos in vivo, que el dsRNA de largo ta-
maño es cortado en fragmentos de unos 25 nucleótidos y que el RNA
antisentido activa la degradación del mRNA por apareamiento de las
bases (8, 12) (Figura 4). Posteriormente, por ensayos in vitro con
cultivos celulares de Drosophila, se descubrió la maquinaria del
RNAi. Se demostró la existencia de un complejo llamado RISC (RNA-

104