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JOSÉ MIGUEL ORTIZ MELÓN AN. R. ACAD. NAC. FARM.

tiene una secuencia canónica RVXF (R217 KVGF221) y un motivo
«RVXF-like» (L306 SVRF310) de unión a PP1. Estudios de mutagéne-
sis han mostrado que ambas motivos están implicadas en esta unión.
El co-inmunoprecipitado a partir de lisados celulares con SIPP1 re-
sultó ser completamente inactivo, lo que indica que la actividad PP1
estaría totalmente inhibida. Fragmentos de SIPP1 obtenidos en E. coli,
y que contienen los sitios RVXF, resultan ser solo moderadamente
inhibidores, por lo que es posible que los fragmentos de SIPP1 recom-
binante obtenidos en E. coli no posean la conformación adecuada o
no hayan sido modificados convenientemente. Asimismo, es también
posible que co-inmunoprecipite un tercer componente importante
para conseguir la inhibición completa.

FUNCIÓN DE SIPP1 Y PP1 ASOCIADA

Varias líneas de evidencia indican que SIPP1 es un factor de pro-
cesamiento de pre-mRNA. Así, en primer lugar, SIPP1 interacciona
con RNA (23) y con la proteína PQBP1. Ésta, a su vez, se une a otro
factor de procesamiento, la proteína U5-15K, un componente del
complejo U4/U6.U5 compuesto por varias proteínas unidas a RNA de
pequeño tamaño (snRNP). En segundo lugar, estudios de localiza-
ción subcelular con fusiones EGFP-SIPP1 muestran que la proteína
se localiza en compartimentos nucleares denominados «speckles»,
que funcionan como lugares de almacenamiento y/o ensamblaje de
factores proteicos de la maquinaria del procesamiento de pre-mRNA.
Por otra parte, la proteína SIPP1 se ha identificado por espectrome-
tría de masas como un componente de los espliceosomas (25). De
acuerdo con un posible papel en el procesamiento de pre-mRNA,
se ha encontrado, que un fragmento de 192 aminoácidos (180-372)
bloquea casi totalmente el procesamiento de pre-mRNA en extrac-
tos nucleares. Por otro lado, utilizando un sistema experimental
constituido por una construcción que contiene los genes de ß-ga-
lactosidasa y luciferasa separados por una secuencia intrónica, se
ha encontrado, que SIPP1 era capaz de aumentar la eficiencia
de procesamiento del gen reportero más de dos veces, en tanto
que fragmentos derivados de SIPP1 no tenían este efecto (26). Asi-
mismo, mutantes en los que SIPP1 se acumula en el citoplasma, son
mucho menos efectivos en estimular el procesamiento. Todo ello

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