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R. DÍEZ MONTORO Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
Llamando x a la concentración de analito, resulta:
x = (Q) + (PQ) + (PQM) + 2(PQ2) ˜ (Q) + 2(PQ2) = (Q) + 2KQ(P)(Q)2=
(Q)(1 + 2KQ(P)(Q)) Ec. 4
Introduciendo en Ecuación 3 el valor de (Q) obtenido de Ecua-
ción 4 y agrupando las constantes se obtiene:
B= 1
B0 1 + ( x )2
C
B representa la actividad unida específicamente al anticuerpo, y
por tanto, puede escribirse:
B=y–A
B0 = D – A
Siendo:
y = Actividad medida en cpm
A = Actividad inespecífica medida en cpm
D = Actividad en cpm correspondiente a una muestra con x = 0
Se obtiene:
y = A + D-A
1+ ( x )2
C
El exponente 2 se ha obtenido suponiendo una cooperatividad
positiva total. Como un caso más general puede tomar valores dis-
tintos de 2, resultando finalmente:
y = A + D -A Ecuación de los cuatro parámetros (E4P)
+ ( x )b
1 C
Suponiendo que los sitios de unión son idénticos e independien-
tes, el exponente b se hace igual a 1, con lo que la E4P se transforma
en:
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