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VOL. 72 (3), 423-442, 2006 FACTORES ESTRUCTURALES, BIOQUÍMICOS Y...
cada con digoxigenina y para la detección se aplicaron anticuerpos
antidigoxigenina unidos a fosfatasa alcalina o bien sonda marcada
radiactivamente.
FIGURA 10. Hibridación in situ FIGURA 11. Expresión de la
(RNA-RNA) con sonda de lenod 2
leghemoglobina de lupino me-
marcada con S35 y revelada con
emulsión fotográfica. Nódulos diante Northern-blot. A) Tinción
incluidos en Paraplast. del RNA total con Azul de Metileno.
ZI, zona infectada.
B) Hibridación de la misma
membrana con la sonda de LbI
marcada con Digoxigenina.
Revelado con anticuerpos unidos a
fosfatasa alcalina. 1) 1% O2 1 día.
2) 21% O2 1 día. 3) 40% O2 1 día.
4) 1% O2 3 días. 5) 21% O2 3 días.
6) 40% O2 3 días. 7) 1% O2 10
días. 8) 21% O2 10 días. 9) 40% O2
10 días. 10 mg de RNA total. Se
incluye el perfil densitométrico de
los inmunoblots.
La Figura 10 muestra la localización del gen lenod 2 usando sonda
radioactiva y digoxigenina, respectivamente, en una sección longitu-
dinal del nódulo de lupino. Como puede observarse, la localización
coincide con el parénquima o corteza media donde se sitúa la ba-
rrera de resistencia al O2. La localización es muy específica, no en-
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