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VOL. 72 (3), 443-461, 2006 BIOSENSOR AMPEROMÉTRICO PARA LA MEDIDA...
de TEMED. El sistema se mantuvo bajo agitación continua durante
60 minutos, tiempo adecuado para completar la reacción de polime-
rización. Se procedió a la extracción de las micropartículas utilizan-
do en primer lugar una disolución reguladora de fosfato sódico 0,1M
frío, pH 6,0. El precipitado obtenido se lavó con acetona, y se cen-
trifugó a 15.000 r.p.m. durante 15 minutos, obteniéndose un produc-
to sólido, que se liofilizó durante 24 horas. Las micropartículas así
obtenidas se conservaron a –4º C.
TABLA 1. Composición detallada de las fases acuosa y oleosa
de la emulsión precursora
? = 6% ? = 6,5% ? = 7% ? = 7,5% ? = 8%
FASE EXTERNA (oleosa)
Dodecano 450 µl 450 µl 450 µl 450 µl 450 µl
Span 80 150 µl 150 µl 150 µl 150 µl 150 µl
FASE INTERNA (acuosa)
Acrilamida 750 mg 750 mg 750 mg 750 mg 750 mg
45 mg 48,75 mg 52,5 mg 56,25 mg 60 mg
Bisacrilamida
3 ml 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml
Disolución
tampón 9 mg 9 mg 9 mg 9 mg 9 mg
pH 7,0
53,6 mg 53,6 mg 53,6 mg 53,6 mg 53,6 mg
PSA 30 µl 30 µl 30 µl 30 µl 30 µl
Enzima GlOx
(14 UI/mg)
TEMED
El tamaño de poro de la matriz polimérica reticulada obtenida
está determinado por la relación entre la cantidad de agente reticu-
lante y la de monómero. La fracción de agente reticulante (grado de
reticulación) en tanto por ciento viene dada por la expresión:
? = AR(g) × 100
AR(g) + M(g)
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