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VOL. 72 (3), 443-461, 2006 BIOSENSOR AMPEROMÉTRICO PARA LA MEDIDA...

gracias a algunas de sus propiedades como especificidad, selectivi-
dad, facilidad y rapidez de uso, intervalo de linealidad, posibilidad
de miniaturización, bajo coste, etc. (1, 2, 3, 4). Los biosensores cons-
tan de un elemento biológico en íntimo contacto con un transductor
responsable de la medida analítica. Para incrementar, a lo largo del
tiempo, la estabilidad estructural y funcional del material biológico
empleado en el diseño de biosensores, se emplean distintos métodos
de inmovilización, que proporcionan un medio en el que el bioma-
terial se encuentra protegido. Uno de los sistemas de inmovilización
más utilizados consiste en la encapsulación del material biológico
dentro de una matriz polimérica (5, 6). A modo de ejemplo, la glu-
cosa oxidasa se ha inmovilizado, con éxito, en electropolímeros (7,
8), hidrogeles (9, 10) y más recientemente en látex (11). En cuanto
a la galactosa oxidasa se ha inmovilizado en electropolímeros (12,
13, 14), en diferentes películas poliméricas (15, 16, 17) e hidrogeles
(18, 19). Una de las principales aplicaciones de los biosensores com-
puestos por galactosa oxidasa es el estudio del nivel de galactosa en
sangre, ya que este parámetro tiene una gran importancia en quími-
ca clínica para el análisis preventivo de la galactosemia, patología
metabólica en los recién nacidos. La galactosemia es una enferme-
dad en la cual la ausencia de la enzima galactosa fosfatouridil trans-
ferasa produce la incapacidad de utilizar el azúcar simple galactosa,
que compone la mitad de la lactosa, el azúcar que se encuentra en
la leche, esto provoca una acumulación de galactosa dentro del or-
ganismo, y como consecuencia la aparición de lesiones en el hígado
y en el sistema nervioso central.

MATERIALES Y MÉTODOS

Reactivos

Acrilamida, NN’-metilen-bis-acrilamida, galactosa y galactosa
oxidasa (GlOx) (E.C.1.1.3.9) de Dactylium dendroxides con una acti-
vidad de 14UI/mg de sólido fueron suministrados por Sigma-Aldrich
(St. Louis, MO, USA). El persulfato de amonio (PSA), Span 80,
NNN’N’-tetra-metil-etilen-diamina (TEMED) y dodecano por Fluka
(Buchs, Switzerland). La membrana de diálisis con un corte de peso
molecular (MWCO) comprendido entre 12.000 y 14.000 daltons por

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