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2.2.?Microorganismos?totales?y?vivos?
La? determinación? del? número? de? todos? los? microorganismos? presentes? en? el?
agua? se? ha? realizado? por? el? método? del? recuento? directo,? utilizando? naranja? de?
acridina.? Las? muestras? teñidas? se? filtraron? por? una? membrana? Nucleopore? de? 0,2? µm?
de? diámetro? de? poro? y? se? observaron? y? contaron? las? células? verdes? y? rojas? con? un?
microscopio?de?fluorescencia?y?objetivo?de?inmersión?(Nikon).??
El? número? de? microorganismos? totales? en? los? sondeos? Sillero? y? San? Marcos? ha?
sido? de? 6,9? x? 103? y? 5,1? x? 104? por? mL? y? el? porcentaje? de? vivos? 30? y? 52,2%,?
respectivamente.? Estos? resultados? son? menores? a? los? encontrados? en? otros?
manantiales? de? aguas? mineromedicinales? extremadamente? duras? (4,? 5,? 6).? Los?
recuentos? obtenidos? por? esta? técnica? suelen? ser? de? cien? a? mil? veces? mayores? que? los?
obtenidos? por? los? métodos? de? cultivo? debido? a? que? se? contabilizan? todos? los?
microorganismos?presentes,?incluso?los?muertos?o?sin?actividad?metabólica..??
2.3.?Bacterias?aerobias?viables??
La? determinación? del? número? de? bacterias? aerobias? viables? se? ha? utilizado?
desde? finales? del? siglo? XIX,? como? indicador? de? la? calidad? del? agua? de? bebida.? En? las?
aguas? mineromedicinales,? este? recuento,? permite? conocer? si? el? agua? ha? sido? tratada?
con? algún? proceso? de? desinfección? o? si? ha? habido? contaminación? del? acuífero.? Para?
detectar?el?mayor?número?de?estas?bacterias,?presentes?en?este?tipo?de?aguas,?hay?que?
utilizar? medios? de? cultivo? con? diferentes? nutrientes,? períodos? de? incubación? largos? y?
varias? temperaturas? (7,? 8).? En? este? trabajo? se? han? determinado? las? bacterias?
heterótrofas,? utilizando? el? medio? agar? extracto? de? levadura? (9)? y? las? bacterias?
oligotrofas,? empleando? agar? R2A? (7).? El? recuento? de? estas? bacterias? se? realizó? por? las?
técnicas?de?filtración?con?filtros?Millipore?de?0,22?µm?y?dilución?en?placa,?e?incubando?
a? 22º? C,? cinco? días,? a? 37? ºC,? ? 48? horas? y? a? 45?ºC,? 24? horas.? Los? resultados? se? han?
expresado?en?unidades?formadoras?de?colonias?por?mL?de?agua?(ufc/mL).?(Tabla?1).??
El? número? de? bacterias? viables? ha? sido? bajo,? <10? en? el? sondeo? Sillero? y? <100?
ufc/mL? en? el? San? Marcos,? lo? que? indica? que? los? puntos? de? emergencia? están? bien?
protegidos.? Los? valores? obtenidos? son? semejantes? a? los? de? otros? manantiales?
extremadamente?duros?(4,?5).?El?número?de?bacterias?termófilas,?incubadas?a?45?ºC,?ha?
sido? menor? que? el? de? mesófilas,? lo? que? indica? que? la? microbiota? de? estas? aguas? está?
constituida?por?bacterias?mesófilas?que?se?han?adaptado?a?las?elevadas??temperaturas?
del? agua.? Además,? presentan? ? más? bacterias? oligotrofas? que? heterótrofas,? propio? de?
aguas? subterráneas? donde? predominan? las? bacterias? que? viven? con? ? poca? ? materia?
orgánica?(8).??
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? M.ª?Carmen?de?la?Rosa?Jorge?et?al.|67?