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R. DÍEZ MONTORO Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
ABSTRACT
General model and four equations for the fit of calibration curves in RIA.
Comparison of results
A theoretical model for the justification of the equations of the four parameters
and logarithmic-logistic, used empirically in the fit of the calibration curves in RIA,
is presented. From this model other two equations are deduced. The fit of 192
curves of RIA is analyzed for the four equations and the results are interpreted in
terms of the possible characteristics of binding in the union antigen-antibody.
Key words: Equation four parameters.—Immunoanalysis.—Antigen-antibody
reaction.
INTRODUCCIÓN
En el terreno bioquímico-fisiológico es frecuente la existencia de
sustancias cuyas concentraciones en los fluidos biológicos son de-
masiado pequeñas para ser detectadas por las técnicas espectrofoto-
métricas. Por otra parte, muchas de ellas se encuentran mezcladas
con otras de estructura muy semejante (1). La determinación analí-
tica de tales sustancias suponía un doble reto, ya que se necesitaba
una técnica de gran sensibilidad y especificidad. Yallow y Berson
resolvieron el problema poniendo a punto, para la valoración de la
insulina, un método que combina la capacidad de la radioquímica
para la detección de cantidades muy pequeñas, con la cualidad de
distinguir selectivamente entre compuestos muy parecidos, caracte-
rística de las reacciones antígeno-anticuerpo.
El fundamento de la técnica consiste en añadir a la muestra una
cantidad fija de la sustancia objeto de estudio marcada y un anti-
cuerpo específico frente a ella. Puesto que la presencia del átomo
marcador no altera (teóricamente) las propiedades químicas de la
sustancia, el anticuerpo reacciona indiscriminadamente con la no
marcada (presente en la muestra) y con la marcada (añadida). Si se
aísla el complejo antígeno-anticuerpo del resto y se mide su radiac-
tividad, el valor de esta será una función decreciente de la concen-
tración de la muestra.
La determinación de la concentración de las muestras problemas
se realiza mediante su lectura en la correspondiente curva de cali-
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