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J. RUBIO RETAMA Y COLS. ANAL. REAL ACAD. NAL. FARM.

FIGURA 7. Influencia del grado de reticulación del microgel en la Vmax y Kmap del
enzima atrapado

Influencia de la cantidad de micropartículas en la Km aparente (Kmap)
del enzima inmovilizado

Seleccionadas las micropartículas de ? = 3,2,% se depositaron
cantidades crecientes de las mismas sobre la superficie del electrodo,
desde 1mg hasta 6mg. La Figura 8 muestra la variación de los parámetros
cinéticos Vmax y Kmap en función de la cantidad de micropartículas del
biosensor amperométrico. En esta figura, se puede observar como ambos
parámetros aumentan conforme lo hace la cantidad de micropartículas. Al
aumentar la cantidad de micropartículas en el biosensor aumenta la
cantidad de enzima disponible y por ello aumenta Vmax, pero al aumentar
el grosor y la compactación de la capa enzimática se dificulta la difusión
de la glucosa hacia el interior de las micropartículas, lo que hace que la
Kmap aumente. Al utilizar una cantidad de micropartículas de 1 mg en la
preparación del biosensor se obtiene una Kmap muy similar a la del
enzima en disolución (2,5 mM frente a 2 mM respectivamente).

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