Page 28 - 67_02

SAN MARTÍN CIGES Y COLS ANAL. REAL ACAD. FARM.

Las reacciones estudiadas presentan un valor bajo de la entalpía de reacción
concordante con la naturaleza de la unión antígeno-anticuerpo.

Palabras clave: Unión antígeno-anticuerpo.- RIA.- IRMA.

SUMMARY

Study of binding antigen-antibody of some substances by means of
radioinmunoanalysis (RIA) and inmunoradiometric analysis (IRMA)

It has been studied the binding to their specific antibodies, of the following
substances: insulin and dehydroepiandrosterone sulphate (DHEAs) by means of solid-
state RIA, osteocalcin and c-terminal fraction parathormone (PTHc) by means of RIA of
the corresponding solutions, and neuronal specific enolase (NSE), tiroglobuline (Tg) and
the tumoral marker CA549 by means of IRMA. It has been assayed a theoretical model
to explain, in a general way, the antigen-antibody reactions, as well as to evaluate the
influence on the binding of several factors: temperature, kind of antibody, kind of
reaction (in solid state or in solution), antigen features.

The obtained results at the steady-state did not allowed and adequate fit of a
model with binding sites identical and independents. However, a good fit was obtained
with the Hill’s equation. The studied reactions presented a low value of entalpy,
according to the nature of the antigen-antibody binding.
Key words: Binding antigen-antibody.- RIA.- IRMA.

INTRODUCCIÓN

Son numerosos los métodos desarrollados para caracterizar
sistemas de unión de una macromolécula a los ligandos cuando existe
cooperatividad entre los sitios de unión. Estos incluyen el uso del
coeficiente de Hill, la representación de Scatchard y varias
aproximaciones estadísticas. Se han desarrollado ecuaciones para el
cálculo estequiométrico de las macroconstantes de unión. Sin embargo,
existe una considerable confusión en la aplicación de estos métodos y en
la interpretación del comportamiento de la unión (1).

Isotermas de adsorción sigmoideas, coeficientes de Hill mayores
de 1 y representaciones de Scatchard convexas se aceptan como muestra
de cooperatividad positiva (1, 2).

La determinación experimental de la o las constantes de afinidad
en reacciones artígeno-anticuerpo por los métodos convencionales
(Scatchard, Hill, etc.) tropieza de ordinario con la dificultad provocada

2