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M. FE DE LA TORRE Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
RESUMEN
Caracterización espectrofotométrica del sistema Cu(II):PPi,
su implementación como un método para la valoración de pirofosfato
(PPi) en solución
El pirofosfato (PPi) tiene una importante función en numerosos procesos bio-
lógicos. Participa en muchas reacciones enzimáticas catalizadas por transferasas,
hidrolasas, ligasas o sintetasas.
La interacción en solución del Cu(II) con pirofosfato (PPi) modifica el espec-
tro de absorción del catión. Se describen las interacciones químicas involucradas
en el cambio de absorbancia, se identifican los coeficientes de absorción de las
diferentes especies en solución y proponemos un modelo del sistema químico
Cu(II)-PPi. Ya que los cambios en el espectro de absorción son dependientes de la
concentración, nosotros proponemos un método para cuantificar PPi en soluciones
acuosas basado en la modificación del espectro de absorción de Cu(II) en presencia
PPi. Los cambios en la absorción pueden ser monitorizados y utilizados para cuan-
tificar PPi en solución. La determinación es simple, rápida y barata. El límite de
detección del método es 0,1 µmol de PPi en las condiciones del ensayo. Además es
posible usar este método en sistema biológicos que contienen proteínas, nucleóti-
dos, EDTA o magnesio.
Palabras clave: Espectro de absorción.—Química bioinorgánica.—Espectrosco-
pía.—Pirofosfato.—Cobre.
INTRODUCTION
Pyrophosphate (PPi) plays an important role in many biological
processes. It participates in many enzymatic reactions catalysed by
transferases, hydrolases, ligases or synthetases. Phosphoric ester
bound is highly energetic, and most of the reactions that require PPi
make use of it for driving biochemical pathways on the appropriate
direction. PPi is involved for instance in:
iii) the biosynthesis of nucleic acids: the enzymes DNA
polymerase (EC 2.7.7.7) and RNA polymerase (EC 2.7.7.6)
catalyse the transfer of a nucleotide monophosphate to a
polynucleotide chain, with the release of PPi;
iii) the biosynthesis of carbohydrates: cytidylyltransferases
transfer CMP from CTP to activate certain acceptors such as
3-deoxyoctulosonate (EC 2.7.7.38), N-acylneuraminate (EC
2.7.7.43) (1) or choline (EC 2.7.7.15), (2) releasing PPi;
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