Optimización de la inmovilización de glucosa oxidasa en microgeles de poliacrilamida

Resumen

Se propone la síntesis de microgeles de poliacrilamida usando el método de polimerización en emulsión (W/O) concentrada, sin y con glucosa oxidasa de Aspergillus niger atrapada en su red polimérica. En las micropartículas sin enzima se estudió la influencia del agente iniciador en la temperatura máxima de polimerización y el grado de conversión del monómero en función del tiempo. Como resultado de la polimerización se obtuvieron en todos los casos micropartículas esféricas con un tamaño comprendido entre 2,5m y 6,2m de diámetro. En los microgeles con enzima se estudió la influencia del agente reticulante en diversos parámetros cinéticos. La utilización de las micropartículas con enzima como material biológico de un biosensor amperométrico permitió evaluar la actividad enzimática de la glucosa oxidasa atrapada en su red polimérica. La actividad catalítica del enzima atrapado se vio afectada por el grado de reticulación del microgel y como consecuencia la respuesta del biosensor sobre la que también influye la cantidad de micropartículas inmovilizadas en la superficie del electrodo que actúa como transductor del biosensor.

Palabras clave: Síntesis de microgeles. Emulsión concentrada glucosa oxidasa. Inmovilización en microgeles de poliacrilamida.

Abstract

The synthesis of polyacrylamide microgels using the concentrated emulsion pathway (W/O), without and with entrapped glucose oxidase from Aspergillus niger is proposed. The effect of initiator concentration in the maximum temperature of polymerization and the conversion rate of the monomer as a function of time were studied in the microparticles without enzyme. As a result of the polymerization, spherical micropartículas were obtained in all the cases with a range of size between 2.5 m and 6.2 m of diameter In the microgels with enzyme the effect of the cross-linking content in the kinetic parameters was studied.. The use of the microgels with enzyme as the biological material of a amperométric biosensor allowed to evaluate the enzymatic activity of the glucose oxidase entrapped in the polymer. The catalytic activity of the entrapped enzyme and the biosensor response were affected by the cross-linking content of the microgel. The biosensor response was also affected by the quantity of microparticles immobilized in the surface of the electrode that acts as transducer of the biosensor.

Keywords: Synthesis of microgels. Concentrated emulsion. Glucose oxidase. Entrapment in polyacrylamide microgels.