Enriquecimiento-mejora en la eficacia de la realización de la reacción en cadena de la polimerasa de patógenos en alimentos

José Cuadrado Gutiérrez, Cristina Cuadrado García, Belén Cuadrado García

Resumen


Objetivo. Mejorar la eficacia de los ensayos cualitativos por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de patógenos en alimentos. Al realizar un enriquecimiento consistente en hacer una dilución inferior a la 1/10 se pretende adelantar en tiempo, reducir el gasto de medios, se procura posibilitar el completar hasta el 100% las muestras a realizar en una PCR y no disminuir la carga celular diana del alimento. Métodos. Investigación de la presencia o ausencia de una bacteria patógena en un alimento y su concentración por mililitro de disolución, siguiendo el método tradicional a distintas diluciones, en dos matrices. Resultados. Los resultados obtenidos en el experimento con un patógeno en alimentos, evidencia que con diluciones inferiores a 1/10, la concentración bacteriana para un mínimo de horas de incubación adelanta la detección por PCR del ácido desoxirribonucleico (ADN) diana, con valores de ufc/ml por encima de 1x103. Por tanto el tiempo de incubación en un caldo de enriquecimiento se acorta, así como los volúmenes de las disoluciones a incubar. Y de este modo solo es necesario un operario y una estufa de incubación para realizar todas las tareas. Conclusiones. Mayor eficacia al necesitarse menos medios materiales y horas de trabajo. Realización de mayor número de muestras en una misma jornada de trabajo (se posibilita realizar el total de muestras que admite el termociclador por cada puesta en funcionamiento), se acorta el tiempo de análisis en siete horas como mínimo.

Palabras clave


Alimentos; patógenos; enriquecimiento; PCR; eficacia; investigación.

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