Biosensor amperométrico para la medida de galactosa compuesto por microgeles de poliacrilamida

Juan Pablo Hervás Pérez, Marta Sánchez Paniagua López, Beatriz López Ruiz, Enrique López Cabarcos

Resumen


La galactosemia es uno de los errores innatos del metabolismo más frecuentes. Su presentación clínica en niños no tratados puede ser severa, a veces mortal; su diagnóstico es relativamente simple y su tratamiento es muy sencillo y efectivo. Esto ha hecho que en los últimos años se hayan propuesto nuevos diseños de biosensores para la determinación de galactosa basados en galactosa oxidasa. El objetivo del trabajo consistió en la inmovilización de galactosa oxidasa (GlOx) en micropartículas de poliacrilamida (PAA), sintetizadas a partir del método de emulsión concentrada, y su utilización como material biológico de un nuevo biosensor amperométrico para la determinación de galactosa. Para preparar los biosensores de galactosa se depositaron las micropartículas con galactosa oxidasa sobre la superficie de un electrodo de platino y se cubrieron con una membrana de diálisis. Las micropartículas se caracterizaron mediante un analizador de partículas Galai Cis-1, microscopía electrónica de barrido, difracción de rayos X y calorimetría de barrido diferencial. La temperatura de transición vítrea (Tg) de los microgeles de poliacrilamida disminuyó al encapsular en su interior galactosa oxidasa. Se estudió la influencia de distintos factores, tales como grado de reticulación, pH y temperatura en la respuesta del biosensor. Las condiciones óptimas se corresponden a un grado de reticulación del 7%, 40º C y pH 7,0. El sistema de inmovilización propuesto apenas modifica la actividad enzimática, pero parece proteger a la enzima aumentando el intervalo de temperatura en el que es activa.

Palabras clave


Emulsión concentrada; Micropartículas; Electrodo enzimático

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